在干細胞療法及藥物發現等研究領域，三維(3D)細胞培養越來受到人們的關注。然而，3D細胞培養的準備工作可能很困難，并且移液技術不良可能導致在3D細胞培養實驗中產生巨大差異。Picus® Nxt移液器能夠使樣品制備的工作流程標準化并消除因個人移液操作導致的潛在負面影響，是水凝膠制備的理想選擇。

移液技術不良會導致樣品和實驗間的重復性低。制備過程中所使用的水凝膠、移液器及吸頭會使3D細胞培養物的制備具有挑戰性，并且容易產生差異，但重要的影響因素是個人的移液操作。通過使用電動移液器，您可以用預設好移液速度和混合步驟的方案，盡可能減少因個體移液操作引入的差異。

材料和方法

細胞混合物制備

使用Picus® Nxt賽多利斯電動移液器、賽多利斯Safetyspace™濾芯吸頭、賽多利斯Optifit吸頭、GrowDex®水凝膠混合制備細胞混合物。

GrowDex®定量

通過熒光增白劑染色法對GrowDex®進行定量。

活細胞定量

使用基于甲臜的檢測方法對細胞培養中的活細胞進行定量。

結果

充分混合可以改善 3D 細胞培養的結果

當使用Picus® Nxt移液器以中等混合速度（速度5）混合30 - 40次（圖 1）來制備并移取 GrowDex®混合物時，3D 細胞培養重復操作之間的變異系數（CV%）低。按照該工作流程，當移取 100 μL 至 96 孔板時，CV< 3%。

另一方面，不細心的混合操作可能會產生氣泡和泡沫，從而導致細胞數量變化增大，且細胞活力降低（圖2）。同樣地，混合操作不嚴謹也會導致終樣品中水凝膠含量出現很大 差異（圖 3）。

推薦使用賽多利斯 Safetyspace™濾芯吸頭進行3D細胞培養的移液

建議在細胞培養應用中使用賽多利斯Safetyspace™濾芯吸頭，因為濾芯能夠降低交叉污染的風險。

使用單道Picus® Nxt 300 移液器將GrowDex®稀釋液移取到 384 孔板上，過程中采用帶孔板跟蹤功能的多次分液模式（10 × 30 μL），以防止移液到錯誤的孔中（圖 4）。使用同一個吸頭進行總共 176 次重復移取。將 Safetyspace™吸頭與低吸附Safetyspace™吸頭進行比較。作為參考，使用低吸附Safetyspace™吸頭移取 10% FBS-RPMI。